مبدأ عمل جهاز تخليق الببتيد ثلاثي القنوات وتفاصيل عملية التشغيل
- مبدأ التشغيل:
الجزء الأساسي منمُصنِّع ببتيد ثلاثي القنواتتتكون عملية الدمج من ثلاث قنوات مستقلة، كل منها مزودة بخلاط ومفاعل وعمود غسيل. هذه الخطوات الثلاث هي الخطوات الأساسية لعملية الدمج، وهي تسمح بالتحكم في ظروف التفاعل وتحسينها في مراحل مختلفة.
1. الخلاط: في خلاط كل قناة يتم خلط الأحماض الأمينية المراد تفاعلها مع عامل الربط لتشكيل إسترات أو نظائر تفاعلية جاهزة للتفاعل مع مصفوفة الراتنج.
2. المفاعل: في المفاعل، يتم دمج خليط الإسترات النشطة مع مصفوفة الراتينج لتشكيل سلسلة بولي ببتيد جديدة. من خلال التحكم في وقت التفاعل ودرجة الحرارة ودرجة الحموضة، يمكن تحسين تفاعل الاقتران لتقليل الأخطاء والمنتجات الثانوية.
- عمود الغسيل: بعد كل إضافة للأحماض الأمينية، يتم استخدام عمود الغسيل لإزالة المواد غير المتفاعلة والمنتجات الثانوية لضمان الحصول على سلسلة بولي ببتيد مصنعة نقية.
II. إجراءات التشغيل:
1. التهيئة: قبل البدء، يجب تحضير جميع الكواشف والمواد، بما في ذلك الأحماض الأمينية، وعامل الاقتران، ومصفوفة الراتنج، والمنظف وما إلى ذلك. في الوقت نفسه، يجب معايرة المُركِّب للتأكد من أن معدل التدفق والضغط والمعلمات الأخرى لكل قناة طبيعية.
2. تحضير الراتنج الأولي: قم بتحميل الراتنج الأولي في كل قناة، وعادةً ما يكون الراتنج الذي تم تنشيطه، من أجل ربط الحمض الأميني الأول.
3. اقتران الأحماض الأمينية: يتم خلط الحمض الأميني الأول مع عامل الاقتران ثم حقنه في الخلاط لتكوين الإستر النشط. بعد ذلك، يتم نقل الإستر النشط إلى المفاعل ودمجه مع الراتينج لتكوين رابطة ببتيدية.
4. الغسيل والتعطيل: يتم غسل الراتينج باستخدام عمود الغسيل لإزالة الأحماض الأمينية غير المتفاعلة وعامل الاقتران. بعد ذلك، يتم تنفيذ خطوة التعطيل لإزالة أي مجموعات استرات تفاعلية متبقية.
5. الإضافة المتتالية للأحماض الأمينية: كرر الخطوات المذكورة أعلاه، وأضف الأحماض الأمينية اللاحقة واحدًا تلو الآخر حتى تكتمل تسلسل البوليببتيد المطلوب.
6. انقسام وتنقية سلسلة البولي ببتيد: بعد اكتمال اقتران الأحماض الأمينية، يجب فصل سلسلة البولي ببتيد عن مصفوفة الراتينج وتنقيتها. وعادةً ما يتضمن ذلك سلسلة من خطوات التخليل والغسيل وإعادة التنقية.
7. المعالجة النهائية: يتم إجراء التعديلات النهائية على الببتيد الذي تم الحصول عليه، مثل إزالة مجموعات حماية المجموعة النهائية، وغيرها من التثبيتات الكيميائية الضرورية.
المُصنِّع ببتيد ثلاثي القنواتيحقق تخليقًا فعالًا للببتيدات والبروتينات عن طريق التخليق في الطور الصلب. يعتمد مبدأ عمله على عملية تفاعل كيميائي منظمة بدقة، في حين تتضمن إجراءات التشغيل سلسلة من الخطوات المعقدة التي تتطلب التحكم الدقيق في ظروف التفاعل.