مبدأ عمل مُركِّب الببتيد ثلاثي القنوات وتفاصيل عملية التشغيل

1. مبدأ التشغيل:

الجزء الأساسي منمُركِّب ببتيد ثلاثي القنواتثلاث قنوات تخليق مستقلة، كل منها مزودة بخلاط ومفاعل وعمود غسيل. هذه الخطوات الثلاث هي الخطوات الرئيسية لنظام SPPS، حيث تتيح التحكم في ظروف التفاعل وتحسينها في مراحل مختلفة.

1. الخلاط: في خلاط كل قناة، يتم خلط الأحماض الأمينية المراد تفاعلها مع عامل الاقتران لتكوين إسترات تفاعلية أو نظائر جاهزة للتفاعل مع مصفوفة الراتنج.

٢. المفاعل: في المفاعل، يُدمج خليط الإسترات النشطة مع مصفوفة الراتنج لتكوين سلسلة بولي ببتيد جديدة. بالتحكم في زمن التفاعل ودرجة الحرارة ودرجة الحموضة (pH)، يُمكن تحسين تفاعل الاقتران لتقليل الأخطاء والنواتج الثانوية.

3. عمود الغسيل: بعد كل إضافة للأحماض الأمينية، يتم استخدام عمود الغسيل لإزالة المواد غير المتفاعلة والمنتجات الثانوية لضمان الحصول على سلسلة بولي ببتيد مصنعة نقية.

II. إجراءات التشغيل:

١. التهيئة: قبل البدء، يجب تحضير جميع الكواشف والمواد، بما في ذلك الأحماض الأمينية، وعامل الربط، ومصفوفة الراتنج، والمنظف، وغيرها. في الوقت نفسه، يجب معايرة المُركِّب لضمان أن يكون معدل التدفق والضغط والمعلمات الأخرى لكل قناة طبيعية.

2. تحضير الراتنج الأولي: قم بتحميل الراتنج الأولي في كل قناة، وعادةً ما يكون الراتنج الذي تم تنشيطه، من أجل ربط الحمض الأميني الأول.

٣. اقتران الأحماض الأمينية: يُخلط الحمض الأميني الأول مع عامل الاقتران، ثم يُحقن في الخلاط لتكوين الإستر النشط. بعد ذلك، يُنقل الإستر النشط إلى المفاعل ويُدمج مع الراتنج لتكوين رابطة ببتيدية.

٤. الغسيل والتعطيل: يُغسل الراتنج باستخدام عمود غسيل لإزالة الأحماض الأمينية غير المتفاعلة وعامل الاقتران. بعد ذلك، تُجرى خطوة تعطيل لإزالة أي مجموعات إستر تفاعلية متبقية.

5. الإضافة المتتالية للأحماض الأمينية: كرر الخطوات المذكورة أعلاه، وأضف الأحماض الأمينية اللاحقة واحدًا تلو الآخر حتى تكتمل تسلسل البوليببتيد المطلوب.

٦. انقسام وتنقية سلسلة البولي ببتيد: بعد اكتمال عملية اقتران الأحماض الأمينية، يجب فصل سلسلة البولي ببتيد عن مصفوفة الراتنج وتنقيتها. عادةً ما يتضمن ذلك سلسلة من خطوات التخليل والغسل وإعادة التنقية.

7. المعالجة النهائية: يتم إجراء التعديلات النهائية على الببتيد الناتج، مثل إزالة مجموعات الحماية للمجموعة النهائية، وغيرها من التثبيتات الكيميائية الضرورية.

المُركِّب ببتيد ثلاثي القنواتيُحقق تخليقًا فعالًا للببتيدات والبروتينات عن طريق تخليق الطور الصلب. يعتمد مبدأ عمله على عملية تفاعل كيميائي دقيقة التنظيم، بينما تتضمن عملية التشغيل سلسلة من الخطوات المعقدة التي تتطلب تحكمًا دقيقًا في ظروف التفاعل.