Funktionsprinzip und Details des Betriebsablaufs des Dreikanal-Peptidsynthesizers

1. Arbeitsprinzip:

Der Kernteil desDreikanal-Peptidsynthesizerbesteht aus drei unabhängigen Synthesekanälen, die jeweils mit einem Mischer, einem Reaktor und einer Waschsäule ausgestattet sind. Diese drei Schritte sind die Schlüsselschritte des SPPS und ermöglichen die Kontrolle und Optimierung der Reaktionsbedingungen in verschiedenen Phasen.

1. Mischer: Im Mischer jedes Kanals werden die zu reagierenden Aminosäuren mit dem Kopplungsmittel gemischt, um reaktive Ester oder Analoga zu bilden, die zur Reaktion mit der Harzmatrix bereit sind.

2. Reaktor: Im Reaktor wird die Mischung der aktiven Ester mit der Harzmatrix kombiniert, um eine neue Polypeptidkette zu bilden. Durch die Kontrolle der Reaktionszeit, der Temperatur und des pH-Werts kann die Kopplungsreaktion optimiert werden, um Fehler und Nebenprodukte zu reduzieren.

3. Waschsäule: Nach jeder Zugabe von Aminosäuren wird eine Waschsäule verwendet, um nicht umgesetztes Material und Nebenprodukte zu entfernen und so eine reine synthetisierte Polypeptidkette sicherzustellen.

II. Vorgehensweise:

1. Initialisierung: Vor dem Start müssen alle Reagenzien und Materialien vorbereitet werden, einschließlich Aminosäuren, Kopplungsmittel, Harzmatrix, Reinigungsmittel usw. Gleichzeitig muss der Synthesizer kalibriert werden, um sicherzustellen, dass Durchflussrate, Druck und andere Parameter jedes Kanals normal sind.

2. Vorbereitung des Startharzes: Laden Sie das Startharz in jeden Kanal, normalerweise das Harz, das für die Kopplung der ersten Aminosäure aktiviert wurde.

3. Aminosäurekupplung: Die erste Aminosäure wird mit dem Kupplungsmittel vermischt und dann in den Mischer injiziert, um den aktiven Ester zu bilden. Anschließend wird der aktivierte Ester in den Reaktor überführt und mit dem Harz kombiniert, um eine Peptidbindung zu bilden.

4. Waschen und Deaktivieren: Das Harz wird mithilfe einer Waschsäule gewaschen, um nicht umgesetzte Aminosäuren und Kopplungsmittel zu entfernen. Anschließend wird ein Deaktivierungsschritt durchgeführt, um alle verbleibenden reaktiven Estergruppen zu entfernen.

5. Sukzessives Hinzufügen von Aminosäuren: Wiederholen Sie die obigen Schritte und fügen Sie nacheinander weitere Aminosäuren hinzu, bis die gewünschte Polypeptidsequenz vollständig ist.

6. Spaltung und Reinigung der Polypeptidkette: Nachdem alle Aminosäuren gekoppelt sind, muss die Polypeptidkette von der Harzmatrix getrennt und gereinigt werden. Dies umfasst normalerweise eine Reihe von Beiz-, Wasch- und erneuten Reinigungsschritten.

7. Terminale Verarbeitung: Am erhaltenen Peptid werden terminale Modifikationen durchgeführt, wie etwa die Entfernung von Endgruppenschutzgruppen und andere notwendige chemische Stabilisierungen.

DerDreikanal-Peptidsynthesizerermöglicht eine effiziente Synthese von Peptiden und Proteinen durch Festphasensynthese. Das Funktionsprinzip basiert auf einem genau regulierten chemischen Reaktionsprozess, während das Betriebsverfahren eine Reihe komplexer Schritte umfasst, die eine strenge Kontrolle der Reaktionsbedingungen erfordern.