Principio de funcionamiento del sintetizador de péptidos de tres canales y detalles del proceso operativo

1. Principio de funcionamiento:

La parte central de lasintetizador de péptidos de tres canalesConsta de tres canales de síntesis independientes, cada uno equipado con un mezclador, un reactor y una columna de lavado. Estos tres pasos son clave en el SPPS y permiten controlar y optimizar las condiciones de reacción en diferentes etapas.

1. Mezclador: En el mezclador de cada canal se mezclan los aminoácidos a reaccionar con el agente de acoplamiento para formar ésteres reactivos o análogos listos para reaccionar con la matriz de resina.

2. Reactor: En el reactor, la mezcla de ésteres activos se combina con la matriz de resina para formar una nueva cadena polipeptídica. Controlando el tiempo de reacción, la temperatura y el pH, se puede optimizar la reacción de acoplamiento para reducir errores y subproductos.

3. Columna de lavado: después de cada adición de aminoácidos, se utiliza una columna de lavado para eliminar el material que no reaccionó y los subproductos para garantizar una cadena polipeptídica sintetizada pura.

II. Procedimiento operativo:

1. Inicialización: Antes de comenzar, es necesario preparar todos los reactivos y materiales, incluyendo aminoácidos, agente de acoplamiento, matriz de resina, detergente, etc. Al mismo tiempo, es necesario calibrar el sintetizador para garantizar que el caudal, la presión y otros parámetros de cada canal sean normales.

2. Preparación de la resina de inicio: Cargar la resina de inicio en cada canal, normalmente la resina que ha sido activada, para el acoplamiento del primer aminoácido.

3. Acoplamiento de aminoácidos: El primer aminoácido se mezcla con el agente de acoplamiento y luego se inyecta en el mezclador para formar el éster activo. A continuación, el éster activado se transfiere al reactor y se combina con la resina para formar un enlace peptídico.

4. Lavado y desactivación: La resina se lava mediante una columna de lavado para eliminar los aminoácidos no reaccionados y el agente de acoplamiento. A continuación, se realiza una etapa de desactivación para eliminar cualquier grupo éster reactivo restante.

5. Adición sucesiva de aminoácidos: repita los pasos anteriores, agregando los aminoácidos subsiguientes uno por uno hasta completar la secuencia polipeptídica deseada.

6. Escisión y purificación de la cadena polipeptídica: Una vez completado el acoplamiento de aminoácidos, es necesario separar la cadena polipeptídica de la matriz de resina y purificarla. Esto suele implicar una serie de etapas de decapado, lavado y repurificación.

7. Procesamiento terminal: Se realizan modificaciones terminales en el péptido obtenido, como la eliminación de grupos protectores del grupo final y otras estabilizaciones químicas necesarias.

Elsintetizador de péptidos de tres canalesRealiza la síntesis eficiente de péptidos y proteínas mediante síntesis en fase sólida. Su principio de funcionamiento se basa en un proceso de reacción química finamente regulado, mientras que el procedimiento operativo implica una serie de pasos complejos que requieren un control estricto de las condiciones de reacción.