اصل کار و جزئیات فرآیند عملکرد سینت سایزر سه کاناله پپتید
- اصل عمل:
بخش اصلی ازسینت سایزر پپتید سه کانالهسه کانال سنتز مستقل است که هر کدام مجهز به میکسر، راکتور و ستون شستشو است. این سه مرحله مراحل کلیدی SPPS هستند و اجازه می دهند شرایط واکنش در مراحل مختلف کنترل و بهینه شود.
1. میکسر: در میکسر هر کانال، اسیدهای آمینه مورد واکنش با عامل جفت کننده مخلوط می شوند تا استرهای واکنش پذیر یا آنالوگ های آماده برای واکنش با ماتریس رزین را تشکیل دهند.
2. راکتور: در راکتور، مخلوط استرهای فعال با ماتریس رزین ترکیب می شود تا یک زنجیره پلی پپتیدی جدید تشکیل شود. با کنترل زمان واکنش، دما و pH می توان واکنش جفت را برای کاهش خطاها و محصولات جانبی بهینه کرد.
- ستون شستشو: پس از هر افزودن اسیدهای آمینه، یک ستون شستشو برای حذف مواد و محصولات فرعی واکنش نداده استفاده می شود تا زنجیره پلی پپتیدی سنتز شده خالص تضمین شود.
II. روال عملیات:
1. اولیه سازی: قبل از شروع، تمام معرف ها و مواد از جمله اسیدهای آمینه، عامل جفت کننده، ماتریس رزین، مواد شوینده و غیره باید آماده شوند. در عین حال، سینت سایزر باید کالیبره شود تا اطمینان حاصل شود که سرعت جریان، فشار و سایر پارامترهای هر کانال طبیعی است.
2. شروع آماده سازی رزین: رزین اولیه را در هر کانال، معمولاً رزین فعال شده، برای جفت شدن اولین اسید آمینه بارگذاری کنید.
3. آمینو اسید کوپلینگ: اولین اسید آمینه با عامل کوپلینگ مخلوط شده و سپس به مخلوط کن تزریق می شود تا استر فعال را تشکیل دهد. در مرحله بعد، استر فعال شده به راکتور منتقل می شود و با رزین ترکیب می شود تا یک پیوند پپتیدی تشکیل دهد.
4. شستشو و غیرفعال کردن: رزین با استفاده از یک ستون شستشو برای حذف اسیدهای آمینه واکنش نداده و عامل جفت کننده شسته می شود. سپس، یک مرحله غیرفعال سازی برای حذف هر گروه استر واکنش پذیر باقی مانده انجام می شود.
5. افزودن متوالی اسیدهای آمینه: مراحل بالا را تکرار کنید و اسیدهای آمینه بعدی را یکی یکی اضافه کنید تا توالی پلی پپتیدی مورد نظر تکمیل شود.
6. برش و خالص سازی زنجیره پلی پپتیدی: بعد از اینکه تمام آمینو اسیدهای جفت کامل شد، زنجیره پلی پپتیدی باید از ماتریکس رزین جدا شده و خالص شود. این معمولا شامل یک سری مراحل ترشی کردن، شستشو و تصفیه مجدد است.
7. پردازش ترمینال: اصلاحات ترمینال روی پپتید به دست آمده انجام می شود، مانند حذف گروه های محافظ گروه انتهایی و سایر تثبیت های شیمیایی ضروری.
راسینت سایزر پپتید سه کانالهسنتز موثر پپتیدها و پروتئین ها را با سنتز فاز جامد محقق می کند. اصل کار آن بر اساس یک فرآیند واکنش شیمیایی دقیق تنظیم شده است، در حالی که روش عملیاتی شامل یک سری مراحل پیچیده است که نیاز به کنترل دقیق شرایط واکنش دارد.