État du contrôle de la qualité et progrès de la recherche sur les produits pharmaceutiques peptidiques de synthèse

3. Contenu de la recherche

1. Objet d'identification: Résumer les principales approches d'identification dans les pharmacopées mondiales, notamment la RP-HPLC, la spectrométrie de masse, l'analyse des acides aminés (AAA), la RMN, la spectroscopie UV/IR, la cartographie peptidique et les tests d'activité biologique, et comparer la fréquence d'application de chaque méthode dans la ChP, l'USP, l'EP et la pharmacopée indienne.
2. Détermination de la teneur en peptidesRecenser les techniques quantitatives courantes telles que la méthode HPLC avec étalon externe, la RMN quantitative, la spectrophotométrie UV, le dosage de l'azote et le calcul du bilan massique, et clarifier les scénarios applicables pour chaque technologie de test.
3. Recherche sur les impuretés: Classer les impuretés en impuretés liées aux peptides et en impuretés non peptidiques, détailler les sources de génération d'impuretés, les sous-types spécifiques et les méthodes de détection orthogonales correspondantes ; organiser les critères de limite d'impuretés à partir des directives ICH, EP et du projet de directives chinoises.
4. Tests de qualité supplémentaires: Couvrir la détection de routine des indicateurs physico-chimiques, y compris le point isoélectrique, la rotation optique, la teneur en eau, la teneur en contre-ions, la limite microbienne et le test d'endotoxines bactériennes.

4. Résultats de la recherche

1. IdentificationLa chromatographie liquide à haute performance en phase inverse (RP-HPLC) est la méthode d'identification privilégiée à l'échelle mondiale ; la spectrométrie de masse (MS) constitue un outil d'identification complémentaire essentiel dans la Pharmacopée américaine (USP) ; l'analyse de la composition en acides aminés est progressivement abandonnée, mais reste largement utilisée dans la Pharmacopée européenne (EP). Pour les peptides présentant des structures tertiaires spécifiques, un bioessai cellulaire est recommandé comme méthode de vérification d'identification orthogonale.
2. Tests de contenuLa méthode de quantification dominante est l'étalonnage externe par CLHP en phase inverse. La RMN quantitative et la détection ultraviolette constituent des moyens complémentaires efficaces ; le bilan massique et l'analyse élémentaire sont des méthodes classiques de quantification absolue pour l'étalonnage des matières premières sans étalons de référence officiels.
3. Contrôle des impuretésLes impuretés associées aux peptides proviennent principalement de la délétion, de la substitution, de la racémisation, de la désamidation et de l'agrégation d'acides aminés. Leur détection nécessite des combinaisons chromatographiques orthogonales, notamment la CLHP en phase inverse (RP-HPLC), la chromatographie d'interaction hydrophile (HILIC), la chromatographie d'exclusion stérique (SEC) et la CLHP par échange d'ions, couplées à la spectrométrie de masse à haute résolution (MS haute résolution). Pour les impuretés non peptidiques, telles que les solvants résiduels et les contaminants élémentaires, la chromatographie en phase gazeuse (GC) et la spectrométrie de masse à plasma à couplage inductif (ICP-MS) sont les techniques de détection standard. En ce qui concerne les seuils d'impuretés, la Pharmacopée européenne (EP) et le dernier projet de réglementation de la NMPA fixent des limites cohérentes : un seuil de déclaration de 0,1 %, un seuil d'identification de 0,5 % et un seuil de qualification de 1,0 %. Les normes plus strictes de l'ICH Q3A ne sont pas applicables aux produits peptidiques.
4. Inspection auxiliaireLa focalisation isoélectrique capillaire, le titrage de Karl Fischer et la chromatographie ionique sont des méthodes de détection standard éprouvées pour le point isoélectrique, l'humidité et le contre-ion respectivement.

5. Discussion