Principe de fonctionnement du synthétiseur de peptides à trois canaux et détails du processus de fonctionnement

1. Principe de fonctionnement :

La partie centrale de lasynthétiseur de peptides à trois canauxIl s'agit de trois canaux de synthèse indépendants, chacun équipé d'un mélangeur, d'un réacteur et d'une colonne de lavage. Ces trois étapes sont les étapes clés du SPPS et permettent de contrôler et d'optimiser les conditions de réaction à différentes étapes.

1. Mélangeur : Dans le mélangeur de chaque canal, les acides aminés à réagir sont mélangés à l'agent de couplage pour former des esters réactifs ou des analogues prêts à réagir avec la matrice de résine.

2. Réacteur : Dans le réacteur, le mélange d'esters actifs est combiné à la matrice de résine pour former une nouvelle chaîne polypeptidique. En contrôlant le temps de réaction, la température et le pH, la réaction de couplage peut être optimisée pour réduire les erreurs et les sous-produits.

3. Colonne de lavage : après chaque ajout d'acides aminés, une colonne de lavage est utilisée pour éliminer les matières n'ayant pas réagi et les sous-produits afin de garantir une chaîne polypeptidique synthétisée pure.

II. Mode opératoire :

1. Initialisation : avant de commencer, tous les réactifs et matériaux doivent être préparés, notamment les acides aminés, l'agent de couplage, la matrice de résine, le détergent, etc. En même temps, le synthétiseur doit être étalonné pour garantir que le débit, la pression et les autres paramètres de chaque canal sont normaux.

2. Préparation de la résine de départ : Chargez la résine de départ dans chaque canal, généralement la résine qui a été activée, pour le couplage du premier acide aminé.

3. Couplage d'acides aminés : le premier acide aminé est mélangé à l'agent de couplage puis injecté dans le mélangeur pour former l'ester actif. Ensuite, l'ester activé est transféré dans le réacteur et combiné à la résine pour former une liaison peptidique.

4. Lavage et désactivation : la résine est lavée à l'aide d'une colonne de lavage pour éliminer les acides aminés n'ayant pas réagi et l'agent de couplage. Ensuite, une étape de désactivation est réalisée pour éliminer tous les groupes esters réactifs restants.

5. Ajout successif d'acides aminés : répétez les étapes ci-dessus en ajoutant les acides aminés suivants un par un jusqu'à ce que la séquence polypeptidique souhaitée soit terminée.

6. Clivage et purification de la chaîne polypeptidique : une fois le couplage des acides aminés terminé, la chaîne polypeptidique doit être séparée de la matrice de résine et purifiée. Cela implique généralement une série d'étapes de décapage, de lavage et de repurification.

7. Traitement terminal : des modifications terminales sont effectuées sur le peptide obtenu, telles que la suppression des groupes protecteurs des groupes terminaux et d'autres stabilisations chimiques nécessaires.

Lesynthétiseur de peptides à trois canauxréalise une synthèse efficace de peptides et de protéines par synthèse en phase solide. Son principe de fonctionnement repose sur un processus de réaction chimique finement régulé, tandis que le mode opératoire implique une série d'étapes complexes qui nécessitent un contrôle strict des conditions de réaction.