Prinsip kerja dan detail proses operasi sintesis peptida tiga saluran

1. Prinsip kerja :

Bagian inti daripenyintesis peptida tiga saluranadalah tiga saluran sintesis independen, masing-masing dilengkapi dengan mixer, reaktor, dan kolom pencucian. Ketiga langkah ini merupakan langkah utama SPPS, dan memungkinkan kondisi reaksi dikontrol dan dioptimalkan pada berbagai tahap.

1. Mixer: Dalam mixer setiap saluran, asam amino yang akan direaksikan dicampur dengan agen penggandeng untuk membentuk ester reaktif atau analog yang siap bereaksi dengan matriks resin.

2. Reaktor: Di dalam reaktor, campuran ester aktif digabungkan dengan matriks resin untuk membentuk rantai polipeptida baru. Dengan mengendalikan waktu reaksi, suhu, dan pH, reaksi penggandengan dapat dioptimalkan untuk mengurangi kesalahan dan produk sampingan.

3. Kolom pencucian: Setelah setiap penambahan asam amino, kolom pencucian digunakan untuk menghilangkan bahan yang tidak bereaksi dan produk sampingan untuk memastikan rantai polipeptida hasil sintesis murni.

II. Prosedur Operasional:

1. Inisialisasi: Sebelum memulai, semua reagen dan bahan perlu dipersiapkan, termasuk asam amino, agen penggandeng, matriks resin, deterjen, dan sebagainya. Pada saat yang sama, synthesizer perlu dikalibrasi untuk memastikan bahwa laju aliran, tekanan, dan parameter lain dari setiap saluran normal.

2. Persiapan Resin Awal: Masukkan resin awal ke dalam setiap saluran, biasanya resin yang telah diaktifkan, untuk penggabungan asam amino pertama.

3. Penggabungan asam amino: asam amino pertama dicampur dengan agen penggandeng lalu disuntikkan ke dalam mixer untuk membentuk ester aktif. Selanjutnya, ester aktif dipindahkan ke reaktor dan digabungkan dengan resin untuk membentuk ikatan peptida.

4. Pencucian dan Penonaktifan: Resin dicuci menggunakan kolom pencucian untuk menghilangkan asam amino dan zat penggandeng yang tidak bereaksi. Kemudian, langkah penonaktifan dilakukan untuk menghilangkan gugus ester reaktif yang tersisa.

5. Penambahan asam amino berturut-turut: Ulangi langkah-langkah di atas, tambahkan asam amino berikutnya satu per satu hingga urutan polipeptida yang diinginkan selesai.

6. Pembelahan dan pemurnian rantai polipeptida: Setelah semua penggabungan asam amino selesai, rantai polipeptida perlu dipisahkan dari matriks resin dan dimurnikan. Proses ini biasanya melibatkan serangkaian langkah pengawetan, pencucian, dan pemurnian ulang.

7. Pemrosesan terminal: Modifikasi terminal dilakukan pada peptida yang diperoleh, seperti penghilangan gugus pelindung gugus akhir, dan stabilisasi kimia lain yang diperlukan.

Itupenyintesis peptida tiga saluranmewujudkan sintesis peptida dan protein yang efisien melalui sintesis fase padat. Prinsip kerjanya didasarkan pada proses reaksi kimia yang diatur secara ketat, sementara prosedur operasinya melibatkan serangkaian langkah rumit yang memerlukan kontrol ketat terhadap kondisi reaksi.