Principio di funzionamento del sintetizzatore peptidico a tre canali e dettagli del processo operativo

1. Principio di funzionamento:

La parte centrale delsintetizzatore peptidico a tre canaliè costituito da tre canali di sintesi indipendenti, ciascuno dotato di un miscelatore, un reattore e una colonna di lavaggio. Questi tre passaggi sono i passaggi chiave dell'SPPS e consentono di controllare e ottimizzare le condizioni di reazione in fasi diverse.

1. Miscelatore: nel miscelatore di ciascun canale, gli amminoacidi da far reagire vengono miscelati con l'agente di accoppiamento per formare esteri reattivi o analoghi pronti a reagire con la matrice di resina.

2. Reattore: nel reattore, la miscela di esteri attivi viene combinata con la matrice di resina per formare una nuova catena polipeptidica. Controllando il tempo di reazione, la temperatura e il pH, la reazione di accoppiamento può essere ottimizzata per ridurre errori e sottoprodotti.

3. Colonna di lavaggio: dopo ogni aggiunta di amminoacidi, viene utilizzata una colonna di lavaggio per rimuovere il materiale non reagito e i sottoprodotti, per garantire una catena polipeptidica sintetizzata pura.

II. Procedura operativa:

1. Inizializzazione: prima di iniziare, tutti i reagenti e i materiali devono essere preparati, inclusi amminoacidi, agente di accoppiamento, matrice di resina, detergente e così via. Allo stesso tempo, il sintetizzatore deve essere calibrato per garantire che la portata, la pressione e altri parametri di ciascun canale siano normali.

2. Preparazione della resina iniziale: caricare la resina iniziale in ciascun canale, solitamente la resina che è stata attivata, per l'accoppiamento del primo amminoacido.

3. Accoppiamento degli amminoacidi: il primo amminoacido viene miscelato con l'agente di accoppiamento e poi iniettato nel miscelatore per formare l'estere attivo. Successivamente, l'estere attivato viene trasferito al reattore e combinato con la resina per formare un legame peptidico.

4. Lavaggio e disattivazione: la resina viene lavata utilizzando una colonna di lavaggio per rimuovere gli amminoacidi non reagiti e l'agente di accoppiamento. Quindi, viene eseguita una fase di disattivazione per rimuovere eventuali gruppi estere reattivi rimanenti.

5. Aggiunta successiva di amminoacidi: ripetere i passaggi precedenti, aggiungendo gli amminoacidi successivi uno alla volta fino al completamento della sequenza polipeptidica desiderata.

6. Scissione e purificazione della catena polipeptidica: dopo che l'accoppiamento di tutti gli amminoacidi è completo, la catena polipeptidica deve essere separata dalla matrice di resina e purificata. Ciò di solito comporta una serie di fasi di decapaggio, lavaggio e ripurificazione.

7. Elaborazione terminale: vengono eseguite modifiche terminali sul peptide ottenuto, come la rimozione dei gruppi protettivi dei gruppi terminali e altre necessarie stabilizzazioni chimiche.

ILsintetizzatore peptidico a tre canalirealizza una sintesi efficiente di peptidi e proteine ​​mediante sintesi in fase solida. Il suo principio di funzionamento si basa su un processo di reazione chimica finemente regolato, mentre la procedura operativa prevede una serie di passaggi complessi che richiedono un controllo rigoroso delle condizioni di reazione.