Principio di funzionamento e dettagli del processo operativo del sintetizzatore peptidico a tre canali

1. Principio di funzionamento:

La parte centrale delsintetizzatore peptidico a tre canaliSi compone di tre canali di sintesi indipendenti, ciascuno dotato di miscelatore, reattore e colonna di lavaggio. Questi tre passaggi sono fondamentali per l'SPPS e consentono di controllare e ottimizzare le condizioni di reazione in diverse fasi.

1. Miscelatore: nel miscelatore di ciascun canale, gli amminoacidi da far reagire vengono miscelati con l'agente di accoppiamento per formare esteri reattivi o analoghi pronti a reagire con la matrice di resina.

2. Reattore: nel reattore, la miscela di esteri attivi si combina con la matrice di resina per formare una nuova catena polipeptidica. Controllando il tempo di reazione, la temperatura e il pH, la reazione di accoppiamento può essere ottimizzata per ridurre errori e sottoprodotti.

3. Colonna di lavaggio: dopo ogni aggiunta di amminoacidi, viene utilizzata una colonna di lavaggio per rimuovere il materiale non reagito e i sottoprodotti, per garantire una catena polipeptidica sintetizzata pura.

II. Procedura operativa:

1. Inizializzazione: prima di iniziare, è necessario preparare tutti i reagenti e i materiali, inclusi amminoacidi, agente di accoppiamento, matrice di resina, detergente e così via. Allo stesso tempo, il sintetizzatore deve essere calibrato per garantire che la portata, la pressione e gli altri parametri di ciascun canale siano normali.

2. Preparazione della resina di partenza: caricare la resina di partenza in ciascun canale, solitamente la resina che è stata attivata, per l'accoppiamento del primo amminoacido.

3. Accoppiamento degli amminoacidi: il primo amminoacido viene miscelato con l'agente di accoppiamento e quindi iniettato nel miscelatore per formare l'estere attivo. Successivamente, l'estere attivato viene trasferito al reattore e combinato con la resina per formare un legame peptidico.

4. Lavaggio e disattivazione: la resina viene lavata utilizzando una colonna di lavaggio per rimuovere gli amminoacidi non reagiti e l'agente di accoppiamento. Successivamente, viene eseguita una fase di disattivazione per rimuovere eventuali gruppi estere reattivi rimanenti.

5. Aggiunta successiva di amminoacidi: ripetere i passaggi precedenti, aggiungendo uno alla volta gli amminoacidi successivi fino al completamento della sequenza polipeptidica desiderata.

6. Scissione e purificazione della catena polipeptidica: una volta completato l'accoppiamento degli amminoacidi, la catena polipeptidica deve essere separata dalla matrice resinosa e purificata. Questo di solito comporta una serie di fasi di decapaggio, lavaggio e ripurificazione.

7. Elaborazione terminale: vengono eseguite modifiche terminali sul peptide ottenuto, come la rimozione dei gruppi protettivi dei gruppi terminali e altre necessarie stabilizzazioni chimiche.

ILsintetizzatore peptidico a tre canaliRealizza la sintesi efficiente di peptidi e proteine ​​mediante sintesi in fase solida. Il suo principio di funzionamento si basa su un processo di reazione chimica finemente regolato, mentre la procedura operativa prevede una serie di passaggi complessi che richiedono uno stretto controllo delle condizioni di reazione.