Prinsip kerja pensintesis peptida tiga saluran dan butiran proses operasi
- Prinsip operasi:
Bahagian teras daripadapensintesis peptida tiga saluranialah tiga saluran sintesis bebas, setiap satu dilengkapi dengan pengadun, reaktor dan lajur basuh. Ketiga-tiga langkah ini adalah langkah utama SPPS, dan mereka membenarkan keadaan tindak balas dikawal dan dioptimumkan pada peringkat yang berbeza.
1. Pengadun: Dalam pengadun setiap saluran, asid amino yang akan bertindak balas dicampur dengan agen gandingan untuk membentuk ester reaktif atau analog sedia untuk bertindak balas dengan matriks resin.
2. Reaktor: Dalam reaktor, campuran ester aktif digabungkan dengan matriks resin untuk membentuk rantai polipeptida baru. Dengan mengawal masa tindak balas, suhu dan pH, tindak balas gandingan boleh dioptimumkan untuk mengurangkan ralat dan produk sampingan.
- Lajur basuh: Selepas setiap penambahan asid amino, lajur cucian digunakan untuk mengeluarkan bahan dan produk sampingan yang tidak bertindak balas untuk memastikan rantai polipeptida tersintesis tulen.
II. Prosedur Operasi:
1. Permulaan: Sebelum memulakan, semua reagen dan bahan perlu disediakan, termasuk asid amino, agen gandingan, matriks resin, detergen dan sebagainya. Pada masa yang sama, pensintesis perlu ditentukur untuk memastikan kadar aliran, tekanan dan parameter lain bagi setiap saluran adalah normal.
2. Penyediaan Resin Permulaan: Muatkan resin permulaan dalam setiap saluran, biasanya resin yang telah diaktifkan, untuk gandingan asid amino pertama.
3. Gandingan asid amino: asid amino pertama dicampur dengan agen gandingan dan kemudian disuntik ke dalam pengadun untuk membentuk ester aktif. Seterusnya, ester yang diaktifkan dipindahkan ke reaktor dan digabungkan dengan resin untuk membentuk ikatan peptida.
4. Pencucian dan Penyahaktifan: Resin dibasuh menggunakan ruang pencuci untuk mengeluarkan asid amino dan agen gandingan yang tidak bertindak balas. Kemudian, langkah penyahaktifan dilakukan untuk membuang mana-mana kumpulan ester reaktif yang tinggal.
5. Penambahan asid amino berturut-turut: Ulang langkah di atas, tambah asid amino seterusnya satu demi satu sehingga jujukan polipeptida yang dikehendaki selesai.
6. Pembelahan dan penulenan rantai polipeptida: Selepas semua gandingan asid amino selesai, rantai polipeptida perlu diasingkan daripada matriks resin dan ditulenkan. Ini biasanya melibatkan satu siri langkah penjerukan, pencucian dan penulenan semula.
7. Pemprosesan terminal: Pengubahsuaian terminal dilakukan pada peptida yang diperoleh, seperti penyingkiran kumpulan pelindung kumpulan akhir, dan penstabilan kimia lain yang diperlukan.
Thepensintesis peptida tiga saluranmerealisasikan sintesis peptida dan protein yang cekap melalui sintesis fasa pepejal. Prinsip kerjanya adalah berdasarkan proses tindak balas kimia yang dikawal dengan baik, manakala prosedur pengendalian melibatkan satu siri langkah kompleks yang memerlukan kawalan ketat terhadap keadaan tindak balas.