Werkingsprincipe van de driekanaals peptidesynthesizer en details van het werkingsproces

1. Werkingsprincipe:

Het kerngedeelte van dedriekanaals peptidesynthesizerbestaat uit drie onafhankelijke synthesekanalen, elk uitgerust met een mixer, reactor en waskolom. Deze drie stappen zijn de belangrijkste stappen van de SPPS en ze maken het mogelijk om de reactieomstandigheden in verschillende stadia te controleren en optimaliseren.

1. Mixer: In de mixer van elk kanaal worden de te reageren aminozuren gemengd met het koppelingsmiddel om reactieve esters of analogen te vormen die klaar zijn om te reageren met de harsmatrix.

2. Reactor: In de reactor wordt het mengsel van actieve esters gecombineerd met de harsmatrix om een ​​nieuwe polypeptideketen te vormen. Door de reactietijd, temperatuur en pH te regelen, kan de koppelingsreactie worden geoptimaliseerd om fouten en bijproducten te verminderen.

3. Waskolom: Na elke toevoeging van aminozuren wordt een waskolom gebruikt om niet-gereageerd materiaal en bijproducten te verwijderen, om een ​​zuivere gesynthetiseerde polypeptideketen te garanderen.

II. Werkprocedure:

1. Initialisatie: Voordat u begint, moeten alle reagentia en materialen worden voorbereid, inclusief aminozuren, koppelingsmiddel, harsmatrix, detergent enzovoort. Tegelijkertijd moet de synthesizer worden gekalibreerd om ervoor te zorgen dat de stroomsnelheid, druk en andere parameters van elk kanaal normaal zijn.

2. Voorbereiding van de starthars: laad de starthars in elk kanaal, meestal de hars die is geactiveerd, voor de koppeling van het eerste aminozuur.

3. Aminozuurkoppeling: het eerste aminozuur wordt gemengd met het koppelingsmiddel en vervolgens in de mixer geïnjecteerd om de actieve ester te vormen. Vervolgens wordt de geactiveerde ester overgebracht naar de reactor en gecombineerd met de hars om een ​​peptidebinding te vormen.

4. Wassen en deactiveren: De hars wordt gewassen met een waskolom om niet-gereageerde aminozuren en koppelingsmiddel te verwijderen. Vervolgens wordt een deactiveringsstap uitgevoerd om alle resterende reactieve estergroepen te verwijderen.

5. Opeenvolgende toevoeging van aminozuren: Herhaal de bovenstaande stappen en voeg de volgende aminozuren één voor één toe totdat de gewenste polypeptidesequentie is voltooid.

6. Splitsing en zuivering van de polypeptideketen: Nadat alle aminozuurkoppeling is voltooid, moet de polypeptideketen worden gescheiden van de harsmatrix en worden gezuiverd. Dit omvat meestal een reeks van beits-, was- en herzuiveringsstappen.

7. Terminale verwerking: Er worden terminale modificaties uitgevoerd op het verkregen peptide, zoals het verwijderen van eindgroepbeschermende groepen en andere noodzakelijke chemische stabilisatie.

Dedriekanaals peptidesynthesizerrealiseert efficiënte synthese van peptiden en eiwitten door vaste-fasesynthese. Het werkprincipe is gebaseerd op een nauwkeurig gereguleerd chemisch reactieproces, terwijl de werkprocedure een reeks complexe stappen omvat die een strikte controle van de reactieomstandigheden vereisen.