Zasada działania i szczegóły procesu operacyjnego trójkanałowego syntezatora peptydów
- Zasada działania:
Główna częśćsyntezator peptydowy trzykanałowyto trzy niezależne kanały syntezy, każdy wyposażony w mikser, reaktor i kolumnę płuczącą. Te trzy kroki są kluczowymi krokami SPPS i pozwalają kontrolować i optymalizować warunki reakcji na różnych etapach.
1. Mikser: W mikserze każdego kanału aminokwasy, które mają zostać poddane reakcji, są mieszane ze środkiem sprzęgającym w celu utworzenia reaktywnych estrów lub analogów gotowych do reakcji z matrycą żywiczną.
2. Reaktor: W reaktorze mieszanina aktywnych estrów jest łączona z matrycą żywicy, aby utworzyć nowy łańcuch polipeptydowy. Kontrolując czas reakcji, temperaturę i pH, można zoptymalizować reakcję sprzęgania, aby zmniejszyć liczbę błędów i produktów ubocznych.
- Kolumna płucząca: Po każdym dodaniu aminokwasów stosuje się kolumnę płuczącą w celu usunięcia niereagującego materiału i produktów ubocznych, aby zapewnić czystość syntetyzowanego łańcucha polipeptydowego.
II. Procedura operacyjna:
1. Inicjalizacja: Przed rozpoczęciem należy przygotować wszystkie odczynniki i materiały, w tym aminokwasy, środek sprzęgający, matrycę żywiczną, detergent itd. Jednocześnie syntezator należy skalibrować, aby upewnić się, że natężenie przepływu, ciśnienie i inne parametry każdego kanału są normalne.
2. Przygotowanie żywicy początkowej: Wprowadź żywicę początkową do każdego kanału, zwykle żywicę, która została aktywowana, w celu sprzężenia pierwszego aminokwasu.
3. Sprzęganie aminokwasów: pierwszy aminokwas miesza się ze środkiem sprzęgającym, a następnie wstrzykuje do mieszalnika, aby utworzyć aktywny ester. Następnie aktywowany ester jest przenoszony do reaktora i łączony z żywicą, aby utworzyć wiązanie peptydowe.
4. Mycie i dezaktywacja: Żywica jest myta za pomocą kolumny myjącej w celu usunięcia niereagujących aminokwasów i środka sprzęgającego. Następnie przeprowadzany jest etap dezaktywacji w celu usunięcia wszelkich pozostałych reaktywnych grup estrowych.
5. Kolejne dodawanie aminokwasów: Powtarzaj powyższe kroki, dodając kolejne aminokwasy jeden po drugim, aż do uzyskania pożądanej sekwencji polipeptydowej.
6. Rozszczepienie i oczyszczenie łańcucha polipeptydowego: Po zakończeniu sprzęgania wszystkich aminokwasów łańcuch polipeptydowy musi zostać oddzielony od matrycy żywicy i oczyszczony. Zazwyczaj obejmuje to szereg etapów trawienia, mycia i ponownego oczyszczania.
7. Obróbka końcowa: Na uzyskanym peptydzie przeprowadzane są modyfikacje końcowe, takie jak usuwanie grup ochronnych grup końcowych i inne niezbędne stabilizacje chemiczne.
Tensyntezator peptydowy trzykanałowyrealizuje wydajną syntezę peptydów i białek poprzez syntezę w fazie stałej. Zasada działania opiera się na ściśle regulowanym procesie reakcji chemicznej, podczas gdy procedura operacyjna obejmuje szereg złożonych kroków, które wymagają ścisłej kontroli warunków reakcji.