Princípio de funcionamento do sintetizador de peptídeos de três canais e detalhes do processo de operação

1. Princípio de operação:

A parte central dosintetizador de peptídeos de três canaissão três canais de síntese independentes, cada um equipado com um misturador, reator e coluna de lavagem. Essas três etapas são as principais etapas do SPPS e permitem que as condições de reação sejam controladas e otimizadas em diferentes estágios.

1. Misturador: No misturador de cada canal, os aminoácidos a serem reagidos são misturados com o agente de acoplamento para formar ésteres ou análogos reativos prontos para reagir com a matriz de resina.

2. Reator: No reator, a mistura de ésteres ativos é combinada com a matriz de resina para formar uma nova cadeia polipeptídica. Ao controlar o tempo de reação, temperatura e pH, a reação de acoplamento pode ser otimizada para reduzir erros e subprodutos.

3. Coluna de lavagem: Após cada adição de aminoácidos, uma coluna de lavagem é usada para remover material não reagido e subprodutos para garantir uma cadeia polipeptídica sintetizada pura.

II. Procedimento Operacional:

1. Inicialização: Antes de começar, todos os reagentes e materiais precisam ser preparados, incluindo aminoácidos, agente de acoplamento, matriz de resina, detergente e assim por diante. Ao mesmo tempo, o sintetizador precisa ser calibrado para garantir que a taxa de fluxo, pressão e outros parâmetros de cada canal estejam normais.

2. Preparação da resina inicial: Carregue a resina inicial em cada canal, geralmente a resina que foi ativada, para o acoplamento do primeiro aminoácido.

3. Acoplamento de aminoácidos: o primeiro aminoácido é misturado com o agente de acoplamento e então injetado no misturador para formar o éster ativo. Em seguida, o éster ativado é transferido para o reator e combinado com a resina para formar uma ligação peptídica.

4. Lavagem e Desativação: A resina é lavada usando uma coluna de lavagem para remover aminoácidos não reagidos e agente de acoplamento. Então, uma etapa de desativação é realizada para remover quaisquer grupos éster reativos restantes.

5. Adição sucessiva de aminoácidos: Repita os passos acima, adicionando aminoácidos subsequentes um por um até que a sequência polipeptídica desejada seja completada.

6. Clivagem e purificação da cadeia polipeptídica: Após todo o acoplamento de aminoácidos estar completo, a cadeia polipeptídica precisa ser separada da matriz de resina e purificada. Isso geralmente envolve uma série de etapas de decapagem, lavagem e repurificação.

7. Processamento terminal: modificações terminais são realizadas no peptídeo obtido, como a remoção de grupos protetores do grupo terminal e outras estabilizações químicas necessárias.

Osintetizador de peptídeos de três canaisrealiza síntese eficiente de peptídeos e proteínas por síntese em fase sólida. Seu princípio de funcionamento é baseado em um processo de reação química finamente regulado, enquanto o procedimento operacional envolve uma série de etapas complexas que exigem controle rígido das condições de reação.