Принцип работы и детали процесса эксплуатации трехканального пептидного синтезатора
- Принцип действия:
Основная частьтрехканальный пептидный синтезатортри независимых канала синтеза, каждый из которых оснащен смесителем, реактором и промывочной колонной. Эти три шага являются ключевыми шагами SPPS, и они позволяют контролировать и оптимизировать условия реакции на разных этапах.
1. Смеситель: в смесителе каждого канала аминокислоты, подлежащие реакции, смешиваются с связующим агентом для образования реакционноспособных эфиров или аналогов, готовых к реакции с матрицей смолы.
2. Реактор: В реакторе смесь активных эфиров объединяется с матрицей смолы для формирования новой полипептидной цепи. Контролируя время реакции, температуру и pH, можно оптимизировать реакцию связывания, чтобы уменьшить ошибки и побочные продукты.
- Промывочная колонка: после каждого добавления аминокислот используется промывочная колонка для удаления непрореагировавшего материала и побочных продуктов, чтобы обеспечить чистоту синтезированной полипептидной цепи.
II. Порядок работы:
1. Инициализация: Перед запуском необходимо подготовить все реагенты и материалы, включая аминокислоты, связующий агент, смоляную матрицу, детергент и т. д. В то же время синтезатор необходимо откалибровать, чтобы убедиться, что скорость потока, давление и другие параметры каждого канала находятся в норме.
2. Подготовка исходной смолы: Загрузите исходную смолу в каждый канал, обычно смолу, которая была активирована, для связывания первой аминокислоты.
3. Аминокислотное связывание: первая аминокислота смешивается с связывающим агентом, а затем вводится в смеситель для образования активного эфира. Затем активированный эфир переносится в реактор и соединяется со смолой для образования пептидной связи.
4. Промывка и дезактивация: смола промывается с использованием промывочной колонки для удаления непрореагировавших аминокислот и связующего агента. Затем выполняется этап дезактивации для удаления любых оставшихся реактивных эфирных групп.
5. Последовательное добавление аминокислот: Повторите описанные выше шаги, добавляя последующие аминокислоты одну за другой, пока не будет завершена желаемая последовательность полипептида.
6. Расщепление и очистка полипептидной цепи: После завершения всех аминокислотных соединений полипептидную цепь необходимо отделить от матрицы смолы и очистить. Обычно это включает в себя ряд этапов травления, промывки и повторной очистки.
7. Конечная обработка: на полученном пептиде выполняются конечные модификации, такие как удаление защитных групп концевых групп и другая необходимая химическая стабилизация.
Theтрехканальный пептидный синтезаторреализует эффективный синтез пептидов и белков методом твердофазного синтеза. Принцип его работы основан на тонко регулируемом процессе химической реакции, а рабочая процедура включает ряд сложных этапов, требующих строгого контроля условий реакции.