Üç kanallı peptit sentezleyici çalışma prensibi ve çalışma süreci detayları

1. Çalışma prensibi:

Çekirdek kısmıüç kanallı peptit sentezleyiciher biri bir mikser, reaktör ve yıkama kolonu ile donatılmış üç bağımsız sentez kanalıdır. Bu üç adım SPPS'nin temel adımlarıdır ve reaksiyon koşullarının farklı aşamalarda kontrol edilmesini ve optimize edilmesini sağlarlar.

1. Karıştırıcı: Her bir kanalın karıştırıcısında, reaksiyona girecek aminoasitler bağlayıcı madde ile karıştırılarak reçine matrisi ile reaksiyona girmeye hazır reaktif esterler veya analoglar oluşturulur.

2. Reaktör: Reaktörde, aktif esterlerin karışımı reçine matrisiyle birleştirilerek yeni bir polipeptit zinciri oluşturulur. Reaksiyon süresi, sıcaklık ve pH kontrol edilerek, hataları ve yan ürünleri azaltmak için birleştirme reaksiyonu optimize edilebilir.

3. Yıkama kolonu: Her aminoasit ilavesinden sonra, reaksiyona girmeyen materyali ve yan ürünleri uzaklaştırmak ve saf sentezlenmiş polipeptit zincirini garantilemek için bir yıkama kolonu kullanılır.

II. İşleyiş Prosedürü:

1. Başlatma: Başlamadan önce, amino asitler, bağlayıcı madde, reçine matrisi, deterjan vb. dahil olmak üzere tüm reaktifler ve malzemeler hazırlanmalıdır. Aynı zamanda, her kanalın akış hızı, basıncı ve diğer parametrelerinin normal olduğundan emin olmak için sentezleyicinin kalibre edilmesi gerekir.

2. Başlangıç ​​Reçine Hazırlığı: Her kanala, genellikle ilk amino asidin bağlanması için aktive edilmiş reçineyi, başlangıç ​​reçinesini yükleyin.

3. Amino asit birleştirme: ilk amino asit birleştirme maddesiyle karıştırılır ve ardından aktif esteri oluşturmak için karıştırıcıya enjekte edilir. Daha sonra, aktifleştirilmiş ester reaktöre aktarılır ve reçineyle birleştirilerek bir peptit bağı oluşturulur.

4. Yıkama ve Deaktivasyon: Reçine, tepkimeye girmeyen amino asitleri ve bağlayıcı maddeyi çıkarmak için bir yıkama kolonu kullanılarak yıkanır. Daha sonra, kalan reaktif ester gruplarını çıkarmak için bir deaktivasyon adımı gerçekleştirilir.

5. Amino asitlerin ardışık olarak eklenmesi: Yukarıdaki adımları tekrarlayın ve istenilen polipeptit dizisi tamamlanana kadar amino asitleri tek tek ekleyin.

6. Polipeptit zincirinin ayrılması ve saflaştırılması: Tüm amino asit eşleşmesi tamamlandıktan sonra, polipeptit zincirinin reçine matrisinden ayrılması ve saflaştırılması gerekir. Bu genellikle bir dizi asitleme, yıkama ve yeniden saflaştırma adımını içerir.

7. Terminal işleme: Elde edilen peptit üzerinde, uç grup koruyucu grupların çıkarılması ve diğer gerekli kimyasal stabilizasyonlar gibi terminal modifikasyonlar gerçekleştirilir.

Theüç kanallı peptit sentezleyicikatı faz sentezi ile peptit ve proteinlerin verimli sentezini gerçekleştirir. Çalışma prensibi ince ayarlanmış bir kimyasal reaksiyon sürecine dayanırken, çalışma prosedürü reaksiyon koşullarının sıkı bir şekilde kontrol edilmesini gerektiren bir dizi karmaşık adımı içerir.