Sự phân cắt và tinh chế Peptide
Các bước cụ thể của quá trình cắt peptide:
1) Lựa chọn thuốc thử phân cắt
Điều quan trọng là phải chọn thuốc thử cắt phù hợp dựa trên trình tự và tính chất của peptide. Các thuốc thử cắt thường dùng bao gồm (TFA), (HCl), v.v.
2) Quá trình phân cắt
Trộn peptit với thuốc thử cắt, đun nóng đến nhiệt độ nhất định và giữ trong thời gian nhất định để phá vỡ chuỗi peptit. Bước này là chìa khóa để giải phóng peptit tổng hợp trên chất mang pha rắn.
3) Làm mát
Sau khi quá trình phân cắt hoàn tất, làm nguội dung dịch phản ứng đến nhiệt độ phòng để dừng phản ứng phân cắt.
4) Ly tâm
Ly tâm dung dịch phản ứng để loại bỏ các chất không hòa tan, chẳng hạn như nhựa.
5) Chiết xuất dung môi
Chiết xuất phần dịch nổi sau khi ly tâm bằng dung môi thích hợp để loại bỏ thuốc thử phân cắt và các tạp chất khác.
Tinh chế peptide:
Tinh chế là một bước quan trọng sau khi cắt, mục đích là loại bỏ tạp chất và tách peptide mục tiêu.
1) Lựa chọn phương pháp thanh lọc
Tùy theo tính chất của peptit mà chọn phương pháp tinh chế thích hợp như sắc ký trao đổi ion, lọc gel, sắc ký pha đảo, v.v.
2) Quá trình thanh lọc
Làm sạch dung dịch peptide thông qua cột làm sạch.
3) Giải hấp
Rửa giải peptit trên cột tinh chế bằng dung môi thích hợp.
4) Sấy đông
Đông khô dung dịch peptide tinh khiết để thu được bột peptide.
Quy trình công nghệ phân cắt peptide là một mắt xích quan trọng trong sản xuất peptide. Công nghệ và các bước liên quan có tác động chính đến việc đảm bảo chất lượng và hiệu quả của sản phẩm cuối cùng. Với sự tiến bộ của công nghệ sinh học và nhu cầu thị trường tăng trưởng, công nghệ phân cắt peptide cũng liên tục được tối ưu hóa và đổi mới, tạo nền tảng vững chắc cho sự phát triển của lĩnh vực y sinh.