Nguyên lý hoạt động của máy tổng hợp peptide ba kênh và chi tiết quy trình vận hành

1. Nguyên lý hoạt động:

Phần cốt lõi củamáy tổng hợp peptide ba kênhlà ba kênh tổng hợp độc lập, mỗi kênh được trang bị một máy trộn, lò phản ứng và cột rửa. Ba bước này là các bước chính của SPPS và chúng cho phép kiểm soát và tối ưu hóa các điều kiện phản ứng ở các giai đoạn khác nhau.

1. Máy trộn: Trong máy trộn của mỗi kênh, các axit amin cần phản ứng được trộn với chất kết hợp để tạo thành este hoặc chất tương tự phản ứng sẵn sàng phản ứng với ma trận nhựa.

2. Lò phản ứng: Trong lò phản ứng, hỗn hợp este hoạt tính được kết hợp với ma trận nhựa để tạo thành chuỗi polypeptide mới. Bằng cách kiểm soát thời gian phản ứng, nhiệt độ và độ pH, phản ứng ghép nối có thể được tối ưu hóa để giảm lỗi và sản phẩm phụ.

3. Cột rửa: Sau mỗi lần bổ sung axit amin, một cột rửa được sử dụng để loại bỏ vật liệu chưa phản ứng và các sản phẩm phụ nhằm đảm bảo chuỗi polypeptide tổng hợp tinh khiết.

II. Quy trình vận hành:

1. Khởi tạo: Trước khi bắt đầu, tất cả các thuốc thử và vật liệu cần được chuẩn bị, bao gồm axit amin, chất kết dính, ma trận nhựa, chất tẩy rửa, v.v. Đồng thời, bộ tổng hợp cần được hiệu chuẩn để đảm bảo lưu lượng, áp suất và các thông số khác của từng kênh là bình thường.

2. Chuẩn bị nhựa ban đầu: Nạp nhựa ban đầu vào mỗi kênh, thường là nhựa đã được hoạt hóa, để ghép nối axit amin đầu tiên.

3. Liên kết amino acid: amino acid đầu tiên được trộn với tác nhân liên kết, sau đó được tiêm vào máy trộn để tạo thành este hoạt động. Tiếp theo, este hoạt động được chuyển đến lò phản ứng và kết hợp với nhựa để tạo thành liên kết peptide.

4. Rửa và vô hiệu hóa: Nhựa được rửa bằng cột rửa để loại bỏ các axit amin chưa phản ứng và tác nhân ghép nối. Sau đó, một bước vô hiệu hóa được thực hiện để loại bỏ bất kỳ nhóm este phản ứng còn lại nào.

5. Thêm axit amin liên tiếp: Lặp lại các bước trên, thêm từng axit amin tiếp theo cho đến khi hoàn thành chuỗi polypeptide mong muốn.

6. Tách và tinh chế chuỗi polypeptide: Sau khi tất cả các liên kết amino acid hoàn tất, chuỗi polypeptide cần được tách khỏi ma trận nhựa và tinh chế. Điều này thường bao gồm một loạt các bước ngâm, rửa và tinh chế lại.

7. Xử lý đầu cuối: Các biến đổi đầu cuối được thực hiện trên peptide thu được, chẳng hạn như loại bỏ các nhóm bảo vệ nhóm đầu cuối và các quá trình ổn định hóa học cần thiết khác.

Cácmáy tổng hợp peptide ba kênhthực hiện tổng hợp peptide và protein hiệu quả bằng tổng hợp pha rắn. Nguyên lý hoạt động của nó dựa trên quá trình phản ứng hóa học được điều chỉnh chặt chẽ, trong khi quy trình vận hành bao gồm một loạt các bước phức tạp đòi hỏi phải kiểm soát chặt chẽ các điều kiện phản ứng.